小麦矮腥黑穗病菌实时荧光PCR固相化试剂盒及其检测方法
专利类型：发明专利
语 言：中文
申 请 号：CN200610054091.2
申 请 日：20060221
申 请 人：重庆大学重庆重大生物技术发展有限公司四川渝高科技有限责任公司
申请人地址：400030重庆市沙坪坝区沙正街174号
公 开 日：20060927
公 开 号：CN1837364A
代 理 人：郭云
代理机构：重庆市前沿专利事务所
摘 要：本发明依据随机引物介导的多聚酶链式反应(RM－PCR)，从美国小麦矮腥黑穗菌(Tilletia controversa KuhnTCK)基因组DNA中克隆鉴定的端粒相关序列特征片段；并研制出基于差异片段序列的特异性引物、探针和实时荧光PCR固相化试剂盒，用于TCK冬孢子或侵染菌丝体等不同样品诊断、鉴定的快速检测方法，从样品制备到检测结果的全过程仅需4小时，固相化试剂盒灵敏度高(几百个拷贝)、特异性强(仅检出TCK)、稳定可靠。该发明可以准确地区分TCK与近源种腥黑穗菌如小麦网腥黑穗菌(Tilletiatriticii Tul，TCT)，解决了形态学鉴定既费时且不准确的难题，可以满足进境疫麦的快速鉴定和后期监管的需求，适用于小麦矮腥黑穗病的早期诊断，麦粒包装等带菌材料的分子检验和近缘种的诊断鉴定。
主 权 项：1.一种小麦矮腥黑穗病菌的片段基因序列，其特征是：长度为1322个核苷酸，包括5’端和3’端，序列如下：01AGTCAGCCACCACCGCCTTTGTCGCAACAGAGCGTGATTGGTCACCCTAGAGCTTCCATG61ACACTGGGAGCTTTATGGAAAGACGGTACCTTAGTCTTCTGGCGCGGCTCCTCTTAAAGC121CGCTGGATGAAGTCTAACTTACCTCGCGGATGGTATGCAGCCATATGACAAGGGTATAAA181GACGTGTATACACAGGAGTGCCGTCGCCCTTCACTGGTCCGAGCCACACGGCACGTCAAA241GACAGGCCGGGCATCCCCGTATATCTTGCCGTGCGCTGTGCACTCCTGCCGCCACATCGT301TTTACATTCTACACAGTACCAAAACAAATCCATCAGATCATGGTTTATCCTCGTCTCTTC361CTCGCTCTCCTTCTCCTCCTTCTGGCCGCAGCTGACACATCTGCGTTCCTGACCGATCGC421GTGTGCGTTTGGTGCCCGGCTGTATCTCAGTAGTCCAATGTGAGTCCGTTCTGATCGACG481TTGTTTGCCTCCGCCAGGCGTTCACATGTTGATTTTAATACAGATCGAAGCTCGTGCAAA541CCCACCAGCCCGCTCAAACAAGTAGCAGACGGACATGTGGTTTCAATCAAGCTTAAATCC601CAAAGGCTTGATGTGTGTGGCCAAAAATGTGCTGTGAAGATGTGCAGGGGATAGGGAAGG661AGGGCGACAGGGCGAGAGGGCGA AAGGCTGGAAGATTGGAAGGGCGGTAGGTATCGAAAG721ACACGGATGACATCAGCACGGAAGAAGGATTTTGCGAATGGTAGTGCTGAGGCCGAAAAG781GTAAATTGGTGCTCAGAGCTCCGTTCCTCCGCGAAGCGAAAACTTCGGCGTTACGTTGCT841AACGATGTGGCGAAACTCTTTATCCACCCGTCACTGCGTCCTGTGTACGGGTACAATTCA901GATATATGAGTACGCTTTGATATATACGATTACGGTGGCTGAATACGTCGTGGAGCCCAG961AAGAGAGAATCTGTAGGGCCTTTGCACTCTGTACGCTAATGGTAGAATAATGTGGAACGC 1021ATCCTGCCGCCTCACAGCGATACATTTTGCGTTGTCGATCTGGACGCTCTATGGAATGCA1081CTGGATCGATGGAGGGCAATGCTCCAACCGTCCGAAGTACTGTTAGCACGATATCTCGCA1141ACACAATTCTGTTCAATGTCATGTCGCCTCGATTACTCTTGCGTCGATGAACCCGACGTT1201CTGATCGTACACATTCCGTCGACAATAATAATTACTCTTTGGCCTCAGTATTGCCCTTTG1261GCCGTTATCTCAAGAGGTTACACATATCACTGTACATAGTTCGTCCGTGTGCTCGGCTGA1321CT。
关 键 词：
法律状态：公开
IPC专利分类号：C12N15/31(2006.01);C12Q1/68(2006.01);C07H21/00(2006.01)