一种基于双极性脉冲电场诱导细胞融合的方法
专利类型：发明专利
语 言：中文
申 请 号：CN201910043384.8
申 请 日：20190117
申 请 人：重庆大学
申请人地址：400030 重庆市沙坪坝区沙正街174号
公 开 日：20190416
公 开 号：CN109628438A
代 理 人：路宁
代理机构：重庆天成卓越专利代理事务所(普通合伙)
摘 要：本发明提出了一种基于双极性脉冲电场诱导细胞融合的方法,包括以下步骤：S1,将不同尺寸的细胞和融合液置于细胞培养槽内；S2,将正弦交流电压施加于细胞培养槽的两极,细胞将排队且彼此紧贴；S3,通过脉冲切换开关,将培养槽两极上所施加的正弦交流电压切换为双极性脉冲电压,槽内细胞发生微小电穿孔；S4,继续通过脉冲切换开关,将双极性脉冲电压切换为正弦电压,作用于已经处于穿孔状态的槽内细胞,己处于开孔状态的细胞上的孔进一步增大,彼此紧贴的两个细胞的外膜彼此连接,两细胞内遗传物质互相融合,最终形成一个完整的融合细胞。本发明相比于传统的单极性微秒脉冲细胞电融合,能够有效地提高细胞融合的成功率。
主 权 项：1.一种基于双极性脉冲电场诱导细胞融合的方法,其特征在于,包括以下步骤：S1,将不同或者相同尺寸的细胞和融合液置于细胞培养槽内；S2,将正弦交流电压施加于细胞培养槽的两极,细胞将排队且彼此紧贴；将正弦交流电压施加于细胞培养槽的两极的方法为：控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令,其中控制器向场效应管K8和场效应管K9发送导通命令,向其余场效应管发送截止命令；此时脉冲第二产生电路向负载电阻R2输出高频高压正弦交流电压；S3,通过脉冲切换开关,将培养槽两极上所施加的正弦交流电压切换为双极性脉冲电压,槽内细胞发生微小电穿孔；正弦交流电压切换为双极性脉冲电压的方法包括以下步骤：S31,控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令,其中,控制器向场效应管S1发送导通信号,向其余场效应管发送截止命令；电源S分别给电容C1～Cn充电；S32,控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令,其中控制器向场效应管S1～Sn、场效应管K2以及场效应管K5～K7发送导通命令,向其余场效应管发送截止命令；此时电容C1～Cn上的电荷通过负载电阻R2释放,在负载电阻R2上输出正极性的脉冲方波；S33,控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令,其中控制器向场效应管S1～Sn、场效应管K3～K4以及场效应管K6～K7发送导通命令,向其余场效应管发送截止命令；此时电容C1～Cn上的电荷通过负载电阻R2释放,在负载电阻R2上输出负极性的脉冲方波；S4,继续通过脉冲切换开关,将双极性脉冲电压切换为正弦电压,作用于已经处于穿孔状态的槽内细胞,己处于开孔状态的细胞上的孔进一步增大,彼此紧贴的两个细胞的外膜彼此连接,两细胞内遗传物质互相融合,最终形成一个完整的融合细胞；双极性脉冲电压切换为正弦电压的方法为：控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令,其中控制器向场效应管K8和场效应管K9发送导通命令,向其余场效应管发送截止命令；此时脉冲第二产生电路向负载电阻R2输出高频高压正弦交流电压；S5,当脉冲施加完毕后,控制器分别同时向场效应管K1～K9以及场效应管S1～Sn发送导通和截止命令,其中控制器向场效应管S1～Sn以及场效应管K1发送导通命令,向其余场效应管发送截止命令,电容C1～Cn上残余的电荷通过放电电阻R1进行释放。
关 键 词：
法律状态：
IPC专利分类号：C12N13/00;C12N15/05;C12N15/06