基于能斯特电势荧光染料的细胞钾电极特性的检测方法
专利类型：发明专利
语 言：中文
申 请 号：CN201110218448.7
申 请 日：20110801
发 明 人：吴泽志张利光宋兆全林雨罗美蓉黄岂平廖彦剑金良李晨钟威廉.S.克萨阿利达陈景龙
申 请 人：重庆大学
申请人地址：400044 重庆市沙坪坝区沙正街174号
公 开 日：20131023
公 开 号：CN102393451B
代 理 人：赵荣之
代理机构：北京同恒源知识产权代理有限公司 11275
摘 要：本发明特别涉及基于Nernst电势荧光染料的细胞钾电极特性评价方法，具体步骤为：构建具Nernst钾电极特性的细胞，以电势荧光染料技术得到[K+]i/f；用钠离子荧光染料评价胞内钠离子浓度；在梯度钾溶液中测量经电势荧光染料染色的待测细胞胞内外荧光强度比，根据Goldman方程以非线性迭代拟合得出f、[K+]i和细胞表观钠/钾通透性比PNa/K，以PNa/K作为评价细胞钾电极特性的定量指标；本发明建立的细胞钾电极特性评价法，为以电势荧光染料技术研究细胞电生物物理特性及离子通道功能表达提供了新的指标和方法，并为材料三维结构下细胞电生物物理特性乃至神经细胞功能分化的非侵入性原位检测提供了可能。
主 权 项：1.基于能斯特电势荧光染料的细胞钾电极特性的检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：A?建立具有能斯特钾电极特性的细胞用钾离子载体对细胞进行处理，得具有能斯特钾电极特性的细胞；B?对细胞内平均钾离子浓度与染料非电势依赖性结合系数的比值的计算将步骤A所述具有能斯特钾电极特性的细胞浸浴在设定的梯度钾离子浓度，即[K+]o的溶液中，用能斯特电势荧光染料染色并平衡，用荧光显微技术对染色平衡后的细胞在同一参数条件下拍照、图像分析，求得细胞内外荧光强度比值[F]i/[F]o，将已知的各组[K+]o和[F]i/[F]o值代入公式 关 键 词： 法律状态：公开 IPC专利分类号：G01N33/50; G01N21/64 中，进行线性拟合，求得具有能斯特钾电极特性的细胞胞内平均钾离子浓度与染料非电势依赖性结合系数的比值，即[K+