一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法
专利类型：发明专利
语 言：中文
申 请 号：CN200710092672.X
申 请 日：20070906
申 请 人：重庆大学
申请人地址：400044重庆市沙坪坝区正街174号
公 开 日：20080326
公 开 号：CN101148662A
代 理 人：胡荣珲
代理机构：重庆志合专利事务所
摘 要：本发明公开了一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法，该方法主要包括步骤：构建诱导型GST－CCR5融合蛋白表达载体并转化粟酒酵母；鉴定粟酒酵母转化子；GST－CCR5融合蛋白在粟酒酵母中的诱导表达；确认CCR5基因在粟酒酵母中得到表达；分离和纯化GST－CCR5融合蛋白；检测分离纯化的GST－CCR5融合蛋白；鉴定分离纯化的GST－CCR5融合蛋白；从GST－CCR5融合蛋白中的分离和纯化人类CCR5蛋白。本发明的方法可以应用于在粟酒酵母中表达高等动植物的膜蛋白，并且获得的蛋白质具有翻译后的修饰作用和生物活性。表达的膜蛋白对于研究其晶体结构和高通量药物筛选有应用价值。
主 权 项：1.一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)构建诱导型GST-CCR5融合蛋白表达载体；(2)将GST-CCR5融合蛋白表达载体转化粟酒酵母，筛选和鉴定粟酒酵母转化子；(3)GST-CCR5融合蛋白在粟酒酵母中的诱导表达；(4)确证CCR5基因在粟酒酵母中得到表达；(5)分离和纯化GST-CCR5融合蛋白；(6)检测分离纯化的GST-CCR5融合蛋白；(7)鉴定分离纯化的GST-CCR5融合蛋白；(8)人类CCR5蛋白从GST-CCR5融合蛋白中的分离和纯化。
关 键 词：
法律状态：
IPC专利分类号：C12N15/09(2006.01);C12N15/62(2006.01);C12N1/19(2006.01);C12P21/02(2006.01);C07K19/00(2006.01)