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一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法

专利类型:发明专利 

语 言:中文 

申 请 号:CN200710092672.X 

申 请 日:20070906 

发 明 人:胡宗利陈绪清陈国平潘宇杨妤欣胡廷章 

申 请 人:重庆大学 

申请人地址:400044 重庆市沙坪坝区正街174号 

公 开 日:20111005 

公 开 号:CN101148662B 

代 理 人:胡荣珲 

代理机构:重庆志合专利事务所 50210 

摘  要:本发明公开了一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法,该方法主要包括步骤:构建诱导型GST-CCR5融合蛋白表达载体并转化粟酒酵母;鉴定粟酒酵母转化子;GST-CCR5融合蛋白在粟酒酵母中的诱导表达;确认CCR5基因在粟酒酵母中得到表达;分离和纯化GST-CCR5融合蛋白;检测分离纯化的GST-CCR5融合蛋白;鉴定分离纯化的GST-CCR5融合蛋白;从GST-CCR5融合蛋白中的分离和纯化人类CCR5蛋白。本发明的方法可以应用于在粟酒酵母中表达高等动植物的膜蛋白,并且获得的蛋白质具有翻译后的修饰作用和生物活性。表达的膜蛋白对于研究其晶体结构和高通量药物筛选有应用价值。 

主 权 项:1、一种异源表达和纯化人艾滋病病毒辅助受体CCR5的方法,其特征在于该方法包括以下步骤:(1)构建诱导型GST-CCR5融合蛋白表达载体;(2)将GST-CCR5融合蛋白表达载体转化粟酒酵母,筛选和鉴定粟酒酵母转化子;(3)GST-CCR5融合蛋白在粟酒酵母中的诱导表达;(4)确证CCR5基因在粟酒酵母中得到表达;(5)分离和纯化GST-CCR5融合蛋白;(6)检测分离纯化的GST-CCR5融合蛋白;(7)鉴定分离纯化的GST-CCR5融合蛋白;(8)人类CCR5蛋白从GST-CCR5融合蛋白中的分离和纯化。 

关 键 词: 

法律状态:生效 

IPC专利分类号:C12N15/09; C12N15/62; C07K19/00; C12P21/02; C12N1/19