一种用接枝槲皮素交联壳聚糖树脂分离荞麦黄酮的方法
专利类型：发明专利
语 言：中文
申 请 号：CN201110045489.0
申 请 日：20110225
申 请 人：重庆大学
申请人地址：400044 重庆市沙坪坝区沙正街174号
公 开 日：20120926
公 开 号：CN102172371B
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摘 要：一种用接枝槲皮素交联壳聚糖树脂分离荞麦黄酮的方法，属于黄酮类化合物的制备技术领域，本发明先以荞麦粉为原料制备出含荞麦黄酮提取液，再以壳聚糖为原料制备出接枝槲皮素交联壳聚糖树脂，然后用接枝槲皮素交联壳聚糖树脂进行吸附，最后经洗脱、真空浓缩及冻干而得荞麦黄酮产品。本发明具有工艺简单，节约能源，无有害废物排放，资源综合利用率高，产品纯度高等特点。采用本发明方法制备出的产品，可广泛应用于医药、保健、化妆品等行业中。在医药行业中，作为合成抗生素、抗肿瘤、降压药等的原料，或作为抗氧化、抗菌等功能性添加剂等。
主 权 项：一种用接枝槲皮素交联壳聚糖树脂分离荞麦黄酮的方法，其特征在于具体方法步骤如下：(1)制备荞麦黄酮提取液以荞麦粉为原料，按荞麦粉的质量∶乙醇体积浓度为40～60％的乙醇溶液体积的比为1G∶30～40ML的比例，先在荞麦粉中加入乙醇溶液，在常温下搅拌溶解2～4小时，然后再放置于离心机中，在转速为6000～10000转/分下，进行离心分离10～20分钟，分别收集离心清液和离心沉淀，将收集的离心沉淀选入闪蒸器中进行干燥；(2)制备接枝槲皮素交联壳聚糖树脂①制备交联壳聚糖溶液第(1)步完成后，以壳聚糖为原料，按壳聚糖的质量∶体积浓度为1％的盐酸溶液的体积比为1G∶25～50ML的比例，先将壳聚糖溶解于盐酸溶液中；再在搅拌条件下加入等体积的液体石蜡进行分散；然后按壳聚糖的质量∶体积浓度为2.5％的戊二醛溶液的体积比为1G∶10～30ML的比例，在液体石蜡分散的壳聚糖溶液中加入戊二醛溶液，进行交联反应20～30分钟；②制备交联壳聚糖微球第(2)?①步完成后，将第(2)?①步制备出的交联反应壳聚糖溶液，先按致孔剂碳酸钙∶壳聚糖的质量比为1∶0.5～1的比例，在交联壳聚糖溶液中加入致孔剂碳酸钙粉末，搅拌混合均匀；然后再用稀氢氧化钠溶液调节体系PH为9～10，再加热升温至60～70℃，并在60～70℃恒温下反应2.5～3.5小时后，将反应溶液泵人抽滤机中，进行第一次抽滤，分别收集第一次抽滤渣和抽滤液；对于收集的第一次抽滤渣，先用等体积的温度为50～60℃热蒸馏水反复进行洗涤2～4次，分别收集洗涤液和洗涤后的滤渣，对于收集的洗涤液，先与收集的第一次抽滤液合并后，再泵人离心机中，在转速为2000～4000转/分下，进行离心分离，分别收集上层液体石蜡和下层清液；对收集的下层清液，经生化处理达标后排放；对于收集的洗涤后的滤渣，先加入3～6倍体积的体积浓度为2～5％的盐酸溶液，在搅拌下溶解洗涤后滤渣中的碳酸钙而形成混合液；然后将该混合液泵人抽滤机中，进行第二次抽滤，分别收集脱碳酸钙滤过液和脱碳酸钙滤渣，将收集的脱碳酸钙滤过液泵入蒸发器中，在80～100℃下，进行蒸发浓缩，回收氯化钙浓缩液；对于收集的脱碳酸钙滤渣，先用蒸馏水反复进行洗涤至洗涤液的PH值为6.5～7.5为止，分别收集洗涤液和洗涤后的碳酸钙滤渣，即为制备出的交联壳聚糖微球；对于洗涤液，经生化处理，达标后排放；③制备接枝槲皮素交联壳聚糖树脂第(2)?②步完成后，按第(2)?②步制备出的交联壳聚糖微球中的游离羟基∶1，6己二醇?二缩水甘油醚∶槲皮素游离羟基的摩尔比为1∶1∶5～15的比例，先将第(2)?②步制备出的交联壳聚糖微球加入槲皮素的质量浓度为0.15～0.25％的槲皮素蒸馏水溶液中，搅拌进行分散后，再用稀氢氧化钠调节其PH为9.5～11.5，搅拌吸附50～60分钟后升温至70～95℃，然后加入1，6己二醇?二缩水甘油醚，恒温反应2～4小时；反应完成后通过抽滤机进行抽滤，分别收集滤渣和滤液，对于收集的滤渣，先用3～5倍体积的蒸馏水洗涤，然后再在60～80℃下进行干燥直至恒重；(3)吸附荞麦黄酮第(2)?③步完成后，将第(2)?③步制备出的接枝槲皮素交联壳聚糖树脂装入中压层析柱中，先用与接枝槲皮素交联壳聚糖树脂柱等体积的蒸馏水进行反冲，再泵入第(1)步制备出的荞麦黄酮提取液进行吸附，直至过柱流出液中出现荞麦黄酮时为止，收集过柱流出液，即为卸载荞麦黄酮的过柱流出液，吸附完成后，再次泵入与接枝槲皮素交联壳聚糖树脂柱等体积的蒸馏水进行洗涤，分别收集洗涤流出液和吸附荞麦黄酮的接枝槲皮素交联壳聚糖树脂柱，对收集的洗涤流出液与卸载荞麦黄酮的过柱流出液合并后，先减压蒸馏回收乙醇，再进行好氧处理，达标后排放；(4)洗脱荞麦黄酮第(3)步完成后，在第(3)步收集的吸附荞麦黄酮的接枝槲皮素交联壳聚糖树脂柱中，泵入乙醇体积浓度为85～95％的乙醇溶液进行洗脱，直至洗脱流出液中无荞麦黄酮时为止，乙醇洗脱液的流速为吸附荞麦黄酮的接枝槲皮素交联壳聚糖树脂柱体积的3～5倍/小时；分别收集洗脱流出液和洗脱荞麦黄酮的接枝槲皮素交联壳聚糖树脂；(5)制备荞麦黄酮冻干粉第(4)步完成后，将第(4)步收集的洗脱流出液，泵入真空浓缩装置中，在真空度为?0.6～?0.9MPA、温度为75～90℃下，进行真空浓缩，直至浓缩液中无乙醇气味时为止，收集荞麦黄酮浓缩液和蒸发液；对于收集的荞麦黄酮浓缩液，先在?18℃的冰箱中预冻5～6小时，然后再置于冷冻干燥机中，在温度为?50～?60℃、真空度为25～50PA的条件下，干燥24～30小时，就制备出纯度为85～95％的荞麦黄酮冻干粉。
关 键 词：
法律状态：公开
IPC专利分类号：A61K36/70; G01N30/50