一种用壳聚糖树脂分离羟基脯氨酸的方法
专利类型：发明专利
语 言：中文
申 请 号：CN201010195962.9
申 请 日：20100610
申 请 人：重庆大学
申请人地址：400044 重庆市沙坪坝区沙正街174号
公 开 日：20101020
公 开 号：CN101863816A
代 理 人：
代理机构：
摘 要：一种用壳聚糖树脂分离羟基脯氨酸的方法，属于反应高分子技术领域。本发明以壳聚糖和明胶为原料，先制备壳聚糖树脂，再制备胶原蛋白水解液，然后经吸附、洗脱及冻干而得成品。本发明具有工艺简单，生产设备简单，能耗低，生产成本低，充分利用资源，无“三废”排放，便于推广应用等特点；采用本发明制备出的羟基脯氨酸产品的纯度高，并能制得脯氨酸及调味用水解动物蛋白等副产品。采用本发明制备出的产品，可广泛应用于保健、化妆品行业中坐抗氧化、抗辐射的添加剂；食品行业中作增味剂；营养强化剂及香味料；制药行业中作抗生素、抗肿瘤、降压药等的合成原料等；在加快伤口愈合、减肥等领域也有很广泛的用途。
主 权 项：一种用壳聚糖树脂分离羟基脯氨酸的方法，其特征在于其具体的方法步骤如下：(1)制备壳聚糖树脂①备料按壳聚糖∶戊二醛∶羟基脯氨酸∶碳酸钙的质量百分比为42～44％∶20～22％∶34～36％∶1～2％的比例备料；②制备交联壳聚糖微球第(1)-①步完成后，先将壳聚糖溶于稀盐酸溶液中，配制成质量分数为1～2％的壳聚糖溶液，后在搅拌条件下，将壳聚糖溶液分散在等体积的液体石蜡中，继续搅拌20～30min，再在搅拌条件下，升温至40～50℃；并加入戊二醛交联剂和致孔剂碳酸钙粉末，进行交联反应60～80min；然后用稀氢氧化钠溶液调节体系pH至9～10，并在温度为60～70℃下，继续搅拌反应2.5～3.5h；最后抽滤，分别收集滤渣，弃滤液，对滤渣用60～80℃的蒸馏水洗涤除去液体石蜡，再用稀盐酸溶解滤渣中的碳酸钙，然后用蒸馏水、95％乙醇反复洗涤至中性，收集洗涤液，经旋转蒸发仪回收乙醇；③制备壳聚糖树脂第(1)-②步完成后，先将(1)-①步备好的34～36％羟基脯氨酸，溶解于乙醇浓度为50％的乙醇溶液中，再加入第(1)-②步制备出的交联壳聚糖微球，搅拌吸附50～70min；再加入经乙醇浓度为70％的乙醇溶液，溶解二环己基碳二亚胺的溶液，配制成DCC的摩尔数为羟基脯氨酸摩尔数的1～2倍的溶液，然后用稀氢氧化钠溶液调节体系的pH值为5～7的条件下，反应8～12min，最后对反应液进行抽滤，收集滤渣，弃滤液，对滤渣，先用95％乙醇洗涤除去二环己基碳二亚胺分解产物异脲，再在60～80℃下进行干燥8～12h，收集洗涤滤渣的洗涤液，经旋转蒸发仪回收乙醇；(2)制备胶原蛋白水解溶液第(1)步完成后，以明胶为蛋白质原料，按明胶∶盐酸浓度为6mol/L的盐酸溶液的重量-体积之比为1∶4.5～5.5的比例，先将明胶置于搪瓷反应釜中，在搅拌下加入盐酸溶液，连接好回流装置后，密闭，先升温至110～120℃回流水解19～21h；后冷却至70～80℃，再加入明胶质量19～21％的活性炭，搅拌脱色25～35min，然后进行真空过滤，分别收集滤渣和滤液，对于滤渣，送活性炭再生工厂进行再生；对于滤液，用稀氢氧化钠溶液调节其pH值为2～4，并用去离子水稀释至滤液中的羟基脯氨酸的浓度为2～6mg/mL的胶原蛋白水解溶液；(3)壳聚糖树脂吸附羟基脯氨酸第(2)步完成后，将第(1)步制备出的壳聚糖树脂放置于玻璃层析柱中，先用去离子水反冲洗，排出壳聚糖树脂柱中的气泡，然后以流速为2～6倍树脂柱体积/小时，泵入第(2)步制备出的胶原蛋白水解溶液，过柱，进行壳聚糖树脂吸附羟基脯氨酸，直至过柱液中羟基脯氨酸的浓度为0.1mg/mL时止，然后用1倍树脂柱体积的去离子水洗涤壳聚糖树脂柱，最后分别收集吸附有羟基脯氨酸的壳聚糖树脂和过柱液；(4)制备羟基脯氨酸冻干粉第(3)步完成后，对第(3)步收集的吸附有羟基脯氨酸的壳聚糖树脂，泵入pH值为8～10、乙醇浓度为70～80％的乙醇溶液，以2～4倍树脂柱体积/小时的流速进行洗脱，分别收集第1～2倍树脂柱体积的洗脱液和第2～4.5倍树脂柱体积的洗脱液，直至流出的洗脱液中无羟基脯氨酸为止，将卸载羟基脯氨酸的壳聚糖树脂柱，用去离子水冲洗后，可再次用于吸附羟基脯氨酸；对于分别含羟基脯氨酸和脯氨酸的洗脱流出液，分别泵入真空浓缩装置中，控制真空度为-0.6～-0.9MPa，在75～90℃下浓缩，直至浓缩液波美度达到15Be°时止，将含羟基脯氨酸和脯氨酸的浓缩液分别放入冷冻干燥机中，在温度为-50～-60℃，真空度为25～50Pa条件下，干燥24～30h，收得率是纯度为95.3～98％的羟基脯氨酸冻干粉。
关 键 词：
法律状态：
IPC专利分类号：C07D207/16(2006.01)I;B01J20/30(2006.01)I;B01J20/26(2006.01)I